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| TGF-b1和smad4mRNA在慢性肝炎、肝硬化、肝癌癌旁组织的表达及意义 |
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TGF-b1和smad4mRNA在慢性肝炎、肝硬化、肝癌癌旁组织的表达及意义 |
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| 作者：佚名 文章来源：世界华人消化杂志 点击数： 更新时间：2004-11-1 15:18:42 |
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肝硬化23例，男22例，女1例，年龄16-65(平均38.2±13.3岁)，临床诊断按2000年西安会议修订的诊断标准[14]. 同期肝胆外科手术切除肝癌癌旁组织17例，男15例，女2例，年龄29-73(平均44.2±10.8岁); 手术切除肝囊肿、肝血管瘤、肝破裂等所有病毒学指标阴性的对照肝组织10例，男5例，女5例，年龄27-62(平均42.1±10.8)岁. 标本均经40 g/L甲醛固定，石蜡包埋，常规HE染色及纤维染色，同时检测肝组织中smad4mRNA及TGF-b1的表达情况. 病理诊断按2000年西安会议修订的诊断标准. TGF-b1免疫组化染色试剂盒、DPC4(smad4)原位杂交检测试剂盒、DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司.
1.2 方法
1.2.1 TGF-b1的检测 采用免疫组化染色方法. 切片厚度4 mm. 以武汉博士德生物工程有限公司提供的阳性对照片为阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照. 具体步骤如下: 4 mm厚石蜡切片捞片于POLY-LYSINE预处理后的载玻片上，置烤箱65 °C 60 min; 脱蜡; 梯度乙醇至水; 蒸馏水新鲜配置30 mL/L H2O2室温放置10 min以灭活内源性过氧化物酶，蒸馏水漂洗2 min 3次; 0.01 mol/L枸橼酸盐缓冲液煮沸修复抗原，沸腾后断电，自然冷却; 滴加正常山羊血清封闭液室温放置10 min; 滴加兔抗TGF-b1抗原，37 °C 60 min，0.1 mol/L PBS洗2 m上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] ... 下一页 >>
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